A2780 人卵巢癌細胞

A2780 人卵巢癌細胞

細胞名稱(chēng)：A2780 人卵巢癌細胞

英文名稱(chēng)：Human Ovarian Cancer Cells

種屬來(lái)源：人

組織來(lái)源：卵巢

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)

培養基：89% RPMI-1640培養基 + 2mM 谷氨酰胺 + 10% FBS + 1%雙抗

生長(cháng)條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:4，每周 2~3次

凍存條件：細胞凍存液：80%培養基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

細胞名稱(chēng)：CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞亞株

英文名稱(chēng)：Chinese Hamster Ovary Cells

英文名稱(chēng)：CHO K1，CHOK1，CHO cell clone K1，GM15452

種屬來(lái)源：中國倉鼠

組織來(lái)源：卵巢

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)

培養基：89% F12K培養基(SIGMA,貨號N3520，添加NaHCO3 2.5g/L)+ 10% FBS + 1%雙抗

生長(cháng)條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：細胞凍存液：80%培養基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

細胞名稱(chēng)：SK-OV-3 人卵巢癌細胞

英文名稱(chēng)：Human Ovarian Cancer Cells

別稱(chēng)：SKOV-3，SKOV3，Skov3，SKO3

種屬來(lái)源：人

組織來(lái)源：卵巢腺癌，腹水轉移

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

生長(cháng)特性：貼壁生長(cháng)

培養基：89% McCoy's 5A培養基 + 10% FBS + 1%雙抗

生長(cháng)條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：細胞凍存液：80%培養基 + 10%血清 + 10%DMSO，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

細胞培養操作

1）復蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

注意：a) 該細胞貼壁較慢，建議復蘇、傳代后讓細胞貼壁48-72h后再進(jìn)行后續實(shí)驗操作。 b) 使用0.25%(w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA消化細胞。 c) MCF7是一種生長(cháng)緩慢的細胞系，它會(huì )以松散的三維團簇的形式出現，并伴有一些漂浮的活細胞。懸浮的活細胞可以通過(guò)離心后重新加入到培養瓶中培養。在復蘇后前二代該細胞會(huì )出現貼壁緩慢的情況，是正?，F象。松散的三維團簇細胞慢慢會(huì )擴散形成一個(gè)扁平的單層細胞。如果生長(cháng)速度比正常情況慢，可以嘗試另一批FBS（即血清批次的促生長(cháng)能力可能不同）。此外，將血清濃度增加到20％也可能有助于改善生長(cháng)。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，棄去消化液，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 min，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

c、按6-8 mL/瓶補加培養基，輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心4 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。

d、將細胞懸液按1：2~3比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。

3）細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細胞及細胞培養液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，加 1 mL血清重懸細胞，進(jìn)行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無(wú)血清細胞凍存液，使細胞密度5×10⁶~1×10⁷/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

培養注意事項

1. 收到細胞后首先觀(guān)察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū)，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問(wèn)題，責任由客戶(hù)自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞破碎形成碎片，是正?，F象。貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進(jìn)行培養。

4. 請客戶(hù)用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶?jì)榷嘤嗟呐囵B基可收集備用，細胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶(hù)自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。

5. 建議客戶(hù)收到細胞后，前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸的原因，個(gè)別敏感細胞會(huì )出現不穩定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。

6. 該細胞僅供科研使用。

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專(zhuān)注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè)，坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類(lèi)齊全的細胞系和多種原代細胞、質(zhì)量穩定的細胞培養試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)。本著(zhù)“守正創(chuàng )新，科學(xué)嚴謹"的理念，我們以高標準塑造行業(yè)品牌，以全新視野構建現代企業(yè)，勇于探索和創(chuàng )新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國各省市自治區，與國內多家醫院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系，贏(yíng)得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認可，我們保證將繼續為廣大科研用戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)！

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